بیان ژن متالوتیونین موتانت در فضای پری پلاسمی e.coli

در حال حاضر بدلیل اثرات نامطلوبی که فلزات سنگین بر چرخه ی اکوسیستم و سلامت موجودات زنده می گذارند حذف آنها از اهمیت ویژه ای بر خوردار است. در این پژوهش با بیان پروتئین موتانت smta (این ژن از سیانوباکتری synechococcus sp.pcc 7942 با ایجاد جهش و تبدیل لیزین 45 به سیستئین در پژوهش قبلی دکتر صفار و همکاران بدست آمد) در فضای پری پلاسمی باکتری e.coli bl21 (de3) و ارزیابی بیان آن توسط sds-page و تایید بیان این پروتئین با استفاده از روش وسترن بلات و اندازه گیری غلظت متالوتیونین بیان شده با کمک نمودار استاندارد گلوتاتیون مورد بررسی قرار گرفت. براساس نمودار استاندارد گلوتاتیون، غلظت متالوتیونین در دو ساعت پس از القا 053/0 میکرومول بر میلی لیتر است که بیشترین میزان بیان در طی ساعت های پس از القا بوده است. از آنجایی که میزان بیان پروتئین دو ساعت پس از القا در مقابل سرب افزایش یافت و 075/0 میکرومول بر میلی لیتر محاسبه شده است می توان نتیجه گرفت که میزان بیان پروتئین در شرایط آلودگی فلزات سنگین افزایش می یابد. در انتها به بررسی میزان جذب یون کادمیوم توسط پروتئین بیان شده در فضای پری پلاسمی پرداخته شد. جذب کادمیوم به میزان 515/42 نانومول به ازای هر میلی گرم پروتئین می باشد. از آنجایی که اختلاف میزان جذب کادمیوم توسط نمونه ی موتانت پری پلاسمی و نمونه ی موتانت پری پلاسمی ناچیز بود احتملا این اختلاف جزیی بدلیل این است که در فضای پری پلاسمی شرایط بهتری برای بیان و فولدینگ پروتئین وجود دارد.